helmholtzeyeinstituteРоссийский офтальмологический журналRussian Ophthalmological Journal2072-00762587-5760Real time Publishers10.21516/2072-0076-2023-16-3-94-99helmholtzeyeinstitute-1305Research ArticleКЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯCLINICAL STUDIESНовый метод лечения персистирующих эрозий роговицы после кератопластики высокого рискаA new method to treat persistent corneal erosions after high-risk keratoplastyЧенцоваЕ. В.ChentsovaE. V.

Екатерина Валериановна Ченцова - д-р мед. наук, профессор, начальник отдела травматологии и реконструктивной хирургии

ул. Садовая-Черногрязская, д. 14/19, Москва, 105062

Ekaterina V. Chentsova - Dr. of Med. Sci., professor, head of the department of traumatology and reconstructive surgery

14/19, Sadovaya-Chernogryazskaya St., Moscow, 105062

БоровковаН. В.BorovkovaN. V.

Наталья Валерьевна Боровкова - д-р мед. наук, заведующая отелением биотехнологий и трансфузиологии, доцент кафедры транспланталогии и искусственных органов

Большая Сухаревская площадь, д. 3, Москва, 129090

ул. Островитянова, д. 1, Москва, 117997

Natalia V. Borovkova - Dr. of Med. Sci., head of the department of biotechnology and transfusiology1, associate professor of chair of transplantation and artificial organs

14/19, Sadovaya-Chernogryazskaya St., Moscow, 105062

3, Bolshaya Sukharevskaya Square, Moscow, 129090

БоженкоД. А.BozhenkoD. A.

Дмитрий Андреевич Боженко - аспирант-офтальмолог

ул. Садовая-Черногрязская, д. 14/19, Москва, 105062

Dmitry A. Bozhenko - PhD student, leading researcher, department of traumatology and reconstructive surgery

14/19, Sadovaya-Chernogryazskaya St., Moscow, 105062

panacelium@gmail.comПономаревИ. Н.PonomarevI. N.

Иван Николаевич Пономарев - канд. мед. наук, хирург, старший научный сотрудник лаборатории трансплантации клеток и иммунотипирования

Большая Сухаревская площадь, д. 3, Москва, 129090

Ivan N. Ponomarev - Cand. of Med. Sci., senior researcher, laboratory of cell transplantation and immunotyping

3, Bolshaya Sukharevskaya Square, Moscow, 129090

МакаровП. В.MakarovP. V.

Павель Васильевич Макаров - д-р мед. наук, ведущий научный сотрудник отдела  травматологии и реконструктивной хирургии

ул. Садовая-Черногрязская, д. 14/19, Москва, 105062

Pavel V. Makarov - Dr. of Med. Sci., leading researcher, department of traumatology and reconstructive surgery

14/19, Sadovaya-Chernogryazskaya St., Moscow, 105062

СторожеваМ. В.StorozhevaM. V.

Майя Викторовна Сторожева - научный сотрудник, отделение биотехнологий и трансфузиологии

Большая Сухаревская площадь, д. 3, Москва, 129090

Maya V. Storozheva - researcher, department of biotechnology and transfusiology

3, Bolshaya Sukharevskaya Square, Moscow, 129090

МакаровМ. С.MakarovM. S.

Максим Сергеевич Макаров - канд. биол. наук, старший научный сотрудник, отделение биотехнологий и трансфузиологии

Большая Сухаревская площадь, д. 3, Москва, 129090

Maxim S. Makarov - Cand. of Biol. Sci., senior researcher, department of biotechnology and transfusiology

3, Bolshaya Sukharevskaya Square, Moscow, 129090

ФГБУ «НМИЦ глазных болезней им. Гельмгольца» Минздрава РоссииРоссияHelmholtz National Medical Research Center of Eye DiseasesRussian FederationГБУЗ «НИИ скорой помощи им. Н.В. Склифосовского» департамента здравоохранения города Москвы; ФГАОУ ВО «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова» Минздрава РоссииРоссияN.V. Sklifosovsky Research Institute for Emergency Medicine; Russian N.I. Pirogov National Research Medical UniversityRussian FederationГБУЗ «НИИ скорой помощи им. Н.В. Склифосовского» департамента здравоохранения города МосквыРоссияN.V. Sklifosovsky Research Institute for Emergency MedicineRussian Federation2023111020231639499Copyright © Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Боженко Д.А., Пономарев И.Н., Макаров П.В., Сторожева М.В., Макаров М.С., 20232023Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Боженко Д.А., Пономарев И.Н., Макаров П.В., Сторожева М.В., Макаров М.С.Chentsova E.V., Borovkova N.V., Bozhenko D.A., Ponomarev I.N., Makarov P.V., Storozheva M.V., Makarov M.S.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://roj.igb.ru/jour/article/view/1305

Цель работы – сравнить эффективность применения обычного консервированного амниона и амниона, насыщенного лизатом богатой тромбоцитами плазмы (БоТП) для лечения персистирующих эрозий роговицы (ПЭР) после кератопластик высокого риска. Материал и методы. В течение 12 месяцев под наблюдением находилось 40 пациентов с ПЭР после сквозных кератопластик высокого риска, которые были разделены на 2 равные клинические группы: в основной группе (20 пациентов в возрасте от 34 и до 84 лет) применяли амниотическую мембрану «Флексамер» + лизат БоТП, в группе сравнения (20 пациентов в возрасте от 41 до 80 лет) - только амниотическую мембрану «Флексамер». Покрытие амниотической мембраной применялось при ПЭР сквозного кератотрансплантата после безуспешного консервативного лечения. Амнион пришивали в 2-х мм от лимба непрерывным швом и покрывали мягкой контактной линзой. В качестве источника тромбоцитов использовали кровь здоровых добровольцев, из которой выделяли БоТП с концентрацией тромбоцитов свыше 1000 тыс/мкл, которую затем замораживали при -40°С и размораживали при 0-4°С для получения лизата БоТП. Критериями оценки эффективности являлись сроки эпителизации, количество покрытий амниотической мембраной, количество сохранённых трансплантатов в конце наблюдения.Результаты. Показана биосовместимость лиофилизированной амниотической мембраны, насыщенной факторами роста лизата аутологичной БоТП, ее применение безопасно для пациентов, позволяет сократить сроки эпителизации, уменьшает количество требуемых операций по покрытию ПЭР амнионом, повышает вероятность успешного прозрачного и полупрозрачного приживления сквозного кератотрансплантата.Заключение. Применение лиофилизированной амниотической мембраны, насыщенной факторами роста лизата аутологичной БоТП, - перспективный метод лечения ПЭР сквозного роговичного трансплантата после кератопластики высокого риска. 

Purpose: to compare the effectiveness of conventional preserved amnion and amnion saturated with platelet-rich (PRP) plasma lysate for the treatment of persistent corneal erosions (PCE) after high-risk keratoplasty.Materials and methods. 40 patients with persistent corneal erosions after high-risk penetrating keratoplasty, followed up for 12 months, were divided into two clinical groups of 20 people each. The main group of patients, aged 34 to 84, received Flexamer amniotic membrane + PRP lysate, while the comparison group, aged 41 to 80, received Flexamer amniotic membrane only. Amniotic membrane coating was used in persistent corneal erosions of penetrating keratoplasty after unsuccessful conservative treatment. The amnion was sewn 2 mm from the limb with a continuous suture and covered with a soft contact lens. As a source of platelets, we used the blood of healthy volunteers, from which platelet-rich plasma with platelet concentration of over 1000 thousand/µl was taken, which was then frozen at -40 °C and defrosted at 0…4 °C to obtain PRP lysate. The criteria for evaluating the effectiveness of both groups were the times of epithelialization, the number of amniotic membrane coatings, and the number of preserved transplants at the end of the follow-up.Results. Lyophilized amniotic membrane saturated with autologous PRP lysate growth factors was shown to be biocompatible. It was found to be safe for the patients, to reduce the epithelialization time, to reduce the number of operations required to cover the PÑE with the amnion, and to increase the likelihood of successful transparent and translucent engraftment of a penetrating keratograft.Conclusion. The use of a lyophilized amniotic membrane enriched with growth factors of autologous PRP lysate is a promising method for the treatment of PCE of the penetrating corneal graft after high-risk keratoplasty.

персистирующая эрозия роговицыкератопластика высокого рискаамнионамниотическая мембранабогатая тромбоцитами плазмализат тромбоцитовростостимулирующий эффектpersistent corneal erosionhigh-risk keratoplastyamnionamniotic membraneplatelet-rich plasmaplatelet lysategrowth-stimulating effectReferencesСлонимский А.Ю., Слонимский Ю.Б., Долгий С.С. Сквозная пересадка роговицы при гнойных процессах переднего отрезка глазного яблока. РМЖ. Êëèíè÷åñêàÿ îôòàëüìîëîãèÿ. 2010; 11 (1): 11–4.Slonimsky A.Yu., Slonimsky Yu.B., Dolgiy S.S. End-to-end corneal transplanta tion in purulent processes of the anterior segment of the eyeball. Russian journal of clinical ophthalmology. 2010; 11 (1): 11–4 (In Russ.).Труфанов С.В., Суббот А.М., Маложен С.А., Крахмалева Д.А. Гипотеза иммунной привилегии роговицы и патофизиология отторжения кератотрансплантата. Âåñòíèê îôòàëüìîëîãèè. 2016; 132 (5): 117–24.Trufanov S.V., Subbot A.M., Malozhen S.A., Krakhmaleva D.A. Hypothesis of immune privilege of the cornea and pathophysiology of graft rejection. Vestnik oftalmologii. 2016; 132 (5): 117–24 (In Russ.). doi: 10.17116/oftalma20161325117-124Thompson JrRW, Price MO, Bowers PJ, Price FWJr. Long-term graft survival after penetrating keratoplasty. Ophthalmology. 2003; 110 (7): 1396–402. doi: 10.1016/S0161-6420 (03)00463-9Thompson JrRW, Price MO, Bowers PJ, Price FWJr. Long-term graft survival after penetrating keratoplasty. Ophthalmology. 2003; 110 (7): 1396–402. doi: 10.1016/S0161-6420 (03)00463-9Малюгин Б.Э., Сахнов С.Н., Мясникова В.В. и др. Анализ результатов сквозной трансплантации роговицы в ретроспективном когортном исследовании. Îôòàëüìîõèðóðãèÿ. 2021; 4: 12–20.Malyugin B.E., Sakhnov S.N., Myasnikova V.V., et al. Corneal graft survival analysis after penetrating keratoplasty in a retrospective cohort study. Fyodorov Journal of Ophthalmic Surgery. 2021; 4: 12–20 (In Russ.). https:/doi.org/10.25276/0235-4160-2021-4-12-20Хазамова А.И., Ченцова Е.В., Кугушева А.Э., Слепова О.С., Макаров П.В. Персистирующие эрозии роговичного трансплантата: анализ причин, хирургические методы лечения и профилактики. Òî÷êà çðåíèÿ. ÂîñòîêÇàïàä. 2016; (3): 28–31.Khazamova A.I., Chentsova E.V., Kugusheva A.E., Slepova O.S., Makarov P.V. Persistent erosion of the corneal graft: analysis of causes, surgical methods of treatment and prevention. Point of view. East-West. 2016; (3): 28–31 (In Russ.).Tseng SC. Amniotic membrane transplantation for ocular surface reconstruction. 2001; 21 (4): 481–9. doi: 10.1023/a:1017995810755Tseng SC. Amniotic membrane transplantation for ocular surface reconstruction. 2001; 21 (4): 481–9. doi: 10.1023/a:1017995810755Twiford JD, Trelford-Sauder M. The amnion in surgery, past and present. Am J Obstet Gynecol. 1979; 134 (7): 833–45. doi 10.1016/0002-9378(79)90957-8Twiford JD, Trelford-Sauder M. The amnion in surgery, past and present. Am J Obstet Gynecol. 1979; 134 (7): 833–45. doi 10.1016/0002-9378(79)90957-8Tseng SC, Prabhasawat P, Barton K, Gray T, Meller D. Amniotic membran transplant with or without limbal allograft corneal surface reconstruction in pathients with limbal stem cell deficiency. Arch Ophthalmol. 1998; 116 (4): 431–41. doi: 10.1001/archopht.116.4.431Tseng SC, Prabhasawat P, Barton K, Gray T, Meller D. Amniotic membran transplant with or without limbal allograft corneal surface reconstruction in pathients with limbal stem cell deficiency. Arch Ophthalmol. 1998; 116 (4): 431–41. doi: 10.1001/archopht.116.4.431Gupta S, Paliczak A, Delgado D. Evidence-based indications of plateletrich plasma therapy. Expert Rev Hematol. 2021; 14 (1): 97–108. doi: 10.1080/17474086.2021.1860002Gupta S, Paliczak A, Delgado D. Evidence-based indications of plateletrich plasma therapy. Expert Rev Hematol. 2021; 14 (1): 97–108. doi: 10.1080/17474086.2021.1860002Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Боженко Д.А. и др. Способ хирургического лечения дефектов роговицы различного генеза. Патент РФ № 2782129; 2022.Chentsova E.V., Borovkova N.V., Bozhenko D.A., et al. A method of surgical treatment of corneal defects of various genesis. Patent RU 2782129; 2022 (In Russ.).Amable PR, Carias RB, Teixeira MV, et al. Platelet-rich plasma preparation for regenerative medicine: optimization and quantification of cytokines and growth factors. Stem Cell Res Ther. 2013; 4 (3): 67. doi: 10.1186/scrt218Amable PR, Carias RB, Teixeira MV, et al. Platelet-rich plasma preparation for regenerative medicine: optimization and quantification of cytokines and growth factors. Stem Cell Res Ther. 2013; 4 (3): 67. doi: 10.1186/scrt218Боровкова Н.В., Макаров М.С., Андреев Ю.В., Сторожева М.В., Пономарев И.Н. Оценка цитокинового состава сыворотки крови и препаратов на основе тромбоцитов человека. Ìîëåêóëÿðíàÿ ìåäèöèíà. 2021; 19 (3). 51–7.Borovkova N.V., Makarov M.S., Andreev Yu.V., Storozheva M.V., Ponomarev I.N. Evaluation of the cytokine composition of blood serum and drugs based on human platelets. Malekulyarnaya medicina. 2021; 19 (3). 51–7 (In Russ.). doi: 10.29296/24999490-2021-03-08Макаров М.С., Сторожева М.В., Конюшко О.И., Боровкова Н.В., Хватов В.Б. Влияние концентрации тромбоцитарного фактора роста на пролиферативную активность фибробластов человека. Êëåòî÷íûå òåõíîëîãèè â áèîëîãèè è ìåäèöèíå. 2013; (2): 111–5.Makarov M.S., Storozheva M.V., Konyushko O.I., Borovkova N.V., Khvatov V.B. Effect of concentration of platelet-derived growth factor on proliferative activity of human fibroblasts. Kletochny`e texnologii v biologii i medicine. 2013; 155 (4): 576–80 (In Russ.). doi: 10.1007/s10517-013-2199-9Боровкова Н.В., Макаров М.С., Сторожева М.В., Пономарев И.Н. Способ приготовления лизата тромбоцитов с высоким содержанием факторов роста. Патент РФ № 2739515C1; 2020.Borovkova N.V., Makarov M.S., Storozheva M.V., Ponomarev I.N. Method for preparing platelet lysate with a high content of growth factors. Patent RU 2739515C1; 2020 (In Russ.).Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Макаров П.В. и др. Биологический эффект комбинации лизата тромбоцитов и амниотической мембраны в культуре буккального эпителия. Ðîññèéñêèé îôòàëüìîëîãè÷åñêèé æóðíàë. 2022; 15 (4): 115–20.Chentsova E.V., Borovkova N.V., Makarov P.V., et al. The biological effect of a combination of platelet lysate and amniotic membrane in buccal epithelium culture. Russian ophthalmological journal. 2022; 15 (4): 115–20 (In Russ.). doi. 10.21516/2072-0076-2022-15-4-115-120Боженко Д.А., Ченцова Е.В., Боровкова Н.В. и др. Применение лизата тромбоцитов для увеличения ростостимулирующего эффекта амниотической мембраны in vitro. Îôòàëüìîëîãè÷åñêèå âåäîìîñòè. 2022; 15 (3): 57–62.Bozhenko D.A., Chentsova E.V., Borovkova N.V., et al. The use of platelet lysate to increase the growth-stimulating effect of the amniotic membrane in vitro. Ophthalmologicheskie vedomosti. 2022; 15 (3): 57–62 (In Russ.). https://doi.org/10.17816/OV108704

The authors declare that there are no conflicts of interest present.