helmholtzeyeinstituteРоссийский офтальмологический журналRussian Ophthalmological Journal2072-00762587-5760Real time Publishers10.21516/2072-0076-2023-16-4-122-126helmholtzeyeinstitute-1365Research ArticleЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-ЛАБОРАТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯEXPERIMENTAL AND LABORATORY STUDIESИспользование твердофазного варианта иммуноферментного анализа для этиологической диагностики эндогенных увеитовUsing a solid-phase variant of enzyme immunoassay for the etiological diagnosis of endogenous uveitisКоньковаА. Ю.Kon’kovaA. Yu.

Анна Юрьевна Конькова — канд. мед. наук, ассистент кафедры офтальмологии

ул. Петропавловская, д. 26, Пермь, 614990, Россия

Anna Yu. Kоn’kоva — Cand. of Med. Sci., teaching assistant of the department of ophthalmology

26, Petropavlovskaya St., Perm, 614990, Russia

nu_86@mail.ruГоровицЭ. С.HorowitzE. S.

Эдуард Семенович Горовиц — д-р мед. наук, профессор, заведующий кафедрой микробиологии и вирусологии

ул. Петропавловская, д. 26, Пермь, 614990, Россия

Eduard S. Horowitz — Dr. of Med. Sci., professor, head of the department of micrbiology and virology

26, Petropavlovskaya St., Perm, 614990, Russia

https://orcid.org/0000-0003-2071-9322ГавриловаТ. В.GavrilovaT. V.

Татьяна Валерьевна Гаврилова — член-корр. РАН, д-р мед. наук, профессор, заведующая кафедрой офтальмологии

ул. Петропавловская, д. 26, Пермь, 614990, Россия

Tatiana V. Gavrilova — Corresponding member of RAS, Dr. of Med. Sci., professor, head of ophthalmology department

26, Petropavlovskaya St., Perm, 614990, Russia

https://orcid.org/0000-0002-6169-7978ЧерешневаМ. В.ChereshnevaM. V.

Маргарита Владимировна Черешнева — д-р мед. наук, профессор, главный научный сотрудник лаборатории иммунофизиологии и иммунофармакологии

ул. Первомайская, д. 106, Екатеринбург, 620041, Россия 

Margarita V. Chereshneva — Dr. of Med. Sci., professor, principal researcher, laboratory of immunophysiology and immunopharmacology

106, Pervomayskaya St., Ekaterinburg, 620041, Russia

АфанасьевскаяЕ. В.AfanasievskayaE. V.

Елизавета Викторовна Афанасьевская — канд. мед. наук, доцент кафедры микробиологии и вирусологии

ул. Петропавловская, д. 26, Пермь, 614990, Россия

Elizaveta V. Afanasievskaya — Cand. of Med. Sci., associate professorof the department of micrbiology and virology

26, Petropavlovskaya St., Perm, 614990, Russia

ФГБОУ ВО «Пермский государственный медицинский университет им. акад. Е.А. Вагнера» Минздрава РоссииРоссияAcademician E.A. Wagner Perm State Medical UniversityRussian FederationФГБУН «Институт иммунологии и физиологии» Уральского отделения РАНРоссияInstitute of Immunology and Physiology, Ural Branch of the Russian Academy of SciencesRussian Federation202329122023164122126Copyright © Конькова А.Ю., Горовиц Э.С., Гаврилова Т.В., Черешнева М.В., Афанасьевская Е.В., 20232023Конькова А.Ю., Горовиц Э.С., Гаврилова Т.В., Черешнева М.В., Афанасьевская Е.В.Kon’kova A.Y., Horowitz E.S., Gavrilova T.V., Chereshneva M.V., Afanasievskaya E.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://roj.igb.ru/jour/article/view/1365

Иммуноферментный анализ (ИФА) традиционно используется для диагностики инфекционных заболеваний, в том числе и офтальмологических. Однако исследователи, как правило, ограничиваются дифференцированным выявлением специфических иммуноглобулинов (Ig) различных классов, тогда как ИФА позволяет регистрировать более широкий спектр возникающих иммунных реакций.

Цель работы — оценить эффективность твердофазного варианта ИФА для этиологической диагностики эндогенных увеитов.

Материал и методы

Материал и методы. С помощью ИФА по традиционной методике обследовано 107 пациентов (114 глаз) в возрасте от 19 до 83 лет (в среднем 45,2 ± 2,8 года) с различными клиническими формами эндогенных увеитов. Наряду с определением специфических Ig изучали авидность IgG, а также исследовали «парные» сыворотки.

Результаты

Результаты. При первичном серологическом обследовании специфические IgG обнаружены практически у всех пациентов (к вирусам простого герпеса в 100 %, к цитомегаловирусам — в 96,3 %), специфические IgМ регистрировали в 3,7 % случаев. Специфические IgG к T. gondii регистрировали у 44,9 % обследованных, а у 2 человек — IgМ. Специфические IgG к C. trachomatis обнаружены у 23 пациентов, а в двух случаях — IgМ. При исследовании авидности антител этиология была дополнительно расшифрована в 1,9 % случаев. Изучение «парных» сывороток позволило определить этиологию заболевания еще у 16 пациентов.

Заключение

Заключение. Интегральный подход с использованием всех диагностических возможностей ИФА, в частности дифференцированного определения специфических Ig различных классов и авидности специфических IgG, а также исследования «парных» сывороток, дал возможность значительно повысить диагностические возможности ИФА — как следствие, этиология была расшифрована у 26 (24,3 %) пациентов.

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) has traditionally been used to diagnose infectious diseases, including ophthalmic ones. As a rule, however, investigators are only focused on differentiated detection of specific immunoglobulins (Ig) of varied classes, despite the fact that ELISA is able to register a wider range of emerging immune responses.

Our purpose is to assess the effectiveness of the solid-phase version of ELISA for the etiological diagnosis of endogenous uveitis.

Material and methods

Material and methods. 107 patients (114 eyes) aged 19 to 83 (ave. 45.2 ± 2.8 yrs) with various clinical forms of endogenous uveitis were examined by the traditional ELISA method. Along with the detection of specific Ig, the avidity of IgG and “paired” sera were studied.

Results

Results. In the primary serological examination, specific IgG were found in almost all patients (to herpes simplex viruses in 100 %, and to cytomegaloviruses in 96,3 %). Specific IgM were revealed in 3.7 % of cases. Specific IgG to T. gondii were found in 44.9 % of the patients and in 2 people, IgM. Specific IgG to C. trachomatis were found in 23 patients, and in two cases, IgM. By studying the avidity of antibodies, etiology was additionally deciphered in 1.9 % of patients. The study of “paired” sera helped determine the etiology of the disease in another 16 people.

Conclusion

Conclusion. An integral approach using all diagnostic capabilities of ELISA, in particular the differentiated definition of specific Ig of various classes and the avidity of specific IgG, as well as the study of “paired” sera, made it possible to significantly increase the diagnostic capabilities of ELISA. As a result, the etiology was deciphered in 26 patients (24,3 %).

этиологияэндогенные увеитыиммуноферментный анализetiologyendogenous uveitisenzyme-linked immunosorbent assayReferencesАнцилевич Л.М., Ягудина Л.А. Практическое применение иммуноферментного анализа в диагностике заболеваний. Практическая медицина. 2014; 3 (79): 28–34.Ancilevich L.M., Yagudina L.A. Practical application of enzyme immunoassay in disease diagnosis. Prakticheskaya medicina. 2014; 3 (79): 28–34 (In Russ.).Белая О.Ф., Пак С.Г. Пути совершенствования лабораторной диагностики инфекционных заболеваний. Вестник РАМН. 2010.; 11: 50–3.Belaya O.F., Pak S.G. Ways to improve laboratory diagnostics of infectious diseases. Vestnik RAMN. 2010.; 11: 50–3 (In Russ.).Долгих Т.И., ред. Современные возможности лабораторной диагностики инфекционных заболеваний (методы, алгоритмы, интерпретация результатов). Омск; 2005.Dolgih T.I., ed. Modern capabilities of laboratory diagnostics of infectious diseases (methods, algorithms, interpretation of results). Omsk; 2005 (In Russ.).Долгов В.В., Ракова Н.Г., Колупаев В.Е., Рытикова Н.С. Иммуноферментный анализ в клинико-диагностических лабораториях. М.-ТВЕРЬ: Триада; 2007.Dolgov V.V., Rakova N.G., Kolupaev V.E., Rytikova N.S. Enzyme immunoassay in clinical diagnostic laboratories. Moscow-TVER: Triada; 2007 (In Russ.).Лабинская А.С., Блинкова Л.П., Ещина А.С. Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований. Москва: Медицина; 2004.Labinskaya A.S., Blinkova L.P., Eshchina A.S. General and sanitary microbiology with microbiological research technique. Moscow: Medicina; 2004 (In Russ.).Меньшиков В.В., ред. Методики клинических лабораторных исследований: Справочное пособие. Клиническая микробиология. Бактериологические исследования. Микологические исследования. Паразитологические исследования. Инфекционная иммунодиагностика. Молекулярные исследования в диагностике инфекционных заболеваний. Москва: Лабора; 2009; Т. 3.Men'shikov V.V., ed. Clinical Laboratory Techniques: Reference Manual. Clinical microbiology. Bacteriological studies. Mycological research. Parasitological studies. Infectious immunodiagnostics. Molecular studies in the diagnosis of infectious diseases. Moscow: Labora; 2009; V. 3 (In Russ.).Обрядина А.П., Копнина Е.О. Авидность антител в диагностике инфекционных заболеваний. Лабораторная диагностика инфекционных заболеваний. 2007; 4: 35–41.Obrjadina A.P., Kopnina E.O. Avidity of antibodies in the diagnosis of infectious diseases. Laboratornaja diagnostika infekcionnyh zabolevanij. 2007; 4: 35–41 (In Russ.).Панова И.Е., Дроздова Е.А. Увеиты. Руководство для врачей. Москва: Медицинское информационное агентство; 2014.Panova I.E., Drozdova E.A. Uveity. Guidelines for doctors. Moscow: Meditsinskoe informatsionnoe agentstvo; 2014 (In Russ.).Чернакова Г.М., Майчук Д.Ю., Малышева З.Г. и др. Результаты иммуноферментного анализа сыворотки крови при инфекционно-воспалительных заболеваниях переднего сегмента глаза. Вестник офтальмологии. 2020; 136 (2): 32–37.https://doi.org/10.17116/oftalma202013602132Chernakova G.M., Maichuk D.Iu., Malysheva Z.G., et al. A. Results of enzyme-linked immunoassay of the blood serum in patients with infectious and inflammatory diseases of the anterior segment of the eye. Vestnik Oftal’mologii. 2020; 136 (2): 32–7 (In Russ.). https://doi.org/10.17116/oftalma202013602132Foster C.S., Vitale A.T. Diagnosis and Treatment of Uveitis. 2nd Ed. Jaypee Brothers Medical Publishers; 2013.Foster C.S., Vitale A.T. Diagnosis and Treatment of Uveitis. 2nd Ed. Jaypee Brothers Medical Publishers; 2013.Гулямова М.Д., Камилов Х.М., Файзиева У.С. Клинико-лабораторные особенности герпес-вирусных микст-инфекций глаза. РМЖ. 2005; 4: 139–42.Gulyamova M.D., Kamilov H.M., Fajzieva U.S. Clinicallaboratory features of herpesvirus mixed eye infections. RMZH. 2005; 4: 139–42 (In Russ.).Конькова А.Ю., Горовиц Э.С., Гаврилова Т.В., Черешнева М.В. Опыт серологического обследования пациентов с увеитами с целью расшифровки этиологии заболевания. Медицинский вестник Башкортостана. 2014; 9 (2): 181–3.Kon'kova A.Yu., Horovitz E.S., Gavrilova T.V., Chereshneva M.V. Experience of serological examination of patients with uveitis in order to decipher the etiology of the disease. Medicinskij vestnik Bashkortostana. 2014; 9 (2): 181–3 (In Russ.).Лебедев О.И., Суров А.В., Акентьева Е.В. Особенности верификации воспалительных заболеваний глаз (на примере субъекта Федерации). Офтальмологические ведомости. 2014; 7 (2): 13–7.Lebedev O.I., Surov A.V., Akentieva E.V. Features of inflammatory eye diseases verification (Russian region case-study). Оftalmologicheskie vedomosti. 2014; 7 (2): 13–7 (In Russ.).Максимов В.Ю., Дмитриева О.Г., Евсеев С.Ю., Александрова Н.М. Диагностика и лечение увеитов герпес-вирусной и хламидийной этиологии. Клиническая офтальмология. 2003; 4: 168–71.Maksimov V.Yu., Dmitrieva O.G., Evseev S.Yu., Aleksandrova N.M. Diagnosis and treatment of uveitis herpesvirus and chlamydia etiology. Klinicheskaya oftal'mologiya. 2003; 4: 168–71 (In Russ.).Мальханов В.Б., Зайнутдинова Г.Х., Шевчук Н.Е. Роль герпетических инфекций при передних эндогенных увеитах и оптимизация серологической диагностики. Российский офтальмологический журнал. 2012; 1: 46–50.Mal'hanov V.B., Zajnutdinova G.H., Shevchuk N.E. The role of herpetic infections in anterior endogenous uveitis and optimization of serological diagnosis. Russian ophthalmological journal. 2012; 1: 46–50 (In Russ.).Светлова Е.В., Слепова О.С., Денисова Е.В. и др. Результаты лабораторной диагностики ВГЧ-6-инфекции при разных формах заболеваний глаз. Российский офтальмологический журнал. 2016; 9 (1): 73–7.Svetlova E.V., Slepova O.S., Denisova E.V., et al. Results of laboratory diagnostics of the human herpes virus type 6 in various forms of eye diseases. Russian ophthalmological journal. 2016; 9 (1): 73–7 (In Russ.).Ченцова О.Б., Межевова И.Ю., Качков И.А. Этиология, патогенез, клинические формы, диагностика и лечение офтальмохламидиоза. Клиническая офтальмология. 2004; (1): 35–8.Chentsova O.B., Mezhevova I.Yu., Kachkov I.A. Etiology, pathogenesis, clinical forms, diagnosis and treatment of ophthalmochlamydia. Klinicheskaya oftal'mologiya. 2004; (1): 35–8 (In Russ.).Чернакова Г.М., Аржиматова Г.Ш., Клещева Е.А., Семенова Т.Б. Герпес-вирусы в офтальмологии. Вестник офтальмологии. 2014; 130 (4): 127–31.Chernakova G.M., Arzhimatova G. Sh., Kleshcheva E.A., Semenova T.B. Herpesviruses in ophthalmology. Vestnik oftal’mologii. 2014; 130 (4): 127–31 (In Russ.).Чернакова Г.М., Майчук Д.Ю., Семенова Т.Б. Клиника, диагностика и терапия герпетического кератита на современном этапе: три грани одной проблемы. Российский офтальмологический журнал. 2017; 10 (1): 90–7.Chernakova G.M., Maychuk D.Yu., Semenova T.B. Сlinical manifestations, diagnostics and therapy of herpetic keratitis today: three facets of one problem. Russian ophthalmological journal. 2017; 10 (1): 90–7 (In Russ.). https://doi.org/10.21516/2072-0076-2017-10-1-90-97Шелудько В.С., Девяткова Г.И. Теоретические основы медицинской статистики (статистические методы обработки и анализа материалов научно-исследовательских работ). Изд. 3-е. Пермь: ФГБОУ ВО «ПГМУ им. академика Е.А. Вагнера» Минздрава России; 2016.Van Gelder RN. Ocular pathogens for the twenty-first century. American Journal of ophthalmology. 2010; 150 (5): 595–7.Shelud'ko V.S., Devyatkova G.I. Theoretical foundations of medical statistics (statistical methods of processing and analysis of research materials). 3rd ed. Perm: FSBEI HE “Academician E. A. Wagner Perm State Medical University”; 2016 (In Russ.).Shelud'ko V.S., Devyatkova G.I. Theoretical foundations of medical statistics (statistical methods of processing and analysis of research materials). 3rd ed. Perm: FSBEI HE “Academician E. A. Wagner Perm State Medical University”; 2016 (In Russ.).

The authors declare that there are no conflicts of interest present.