helmholtzeyeinstituteРоссийский офтальмологический журналRussian Ophthalmological Journal2072-00762587-5760Real time Publishers10.21516/2072-0076-2026-19-1-155-160helmholtzeyeinstitute-2062Research ArticleЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-ЛАБОРАТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯEXPERIMENTAL AND LABORATORY STUDIESОценка эффективности применения лизата богатой тромбоцитами плазмы у пациентов после кератопластики по неотложным показаниям на основании анализа изменений протеазно-ингибиторного баланса слезы (пилотное исследование)Evaluation of the efficacy of platelet-rich plasma lysate in patients after urgent keratoplasty based on an analysis of changes in the protease-inhibitor balance of tears (pilot study)ЧенцоваЕ. В.ChentsovaE. V.

Екатерина Валериановна Ченцова — д-р мед. наук, профессор, ведущий научный сотрудник отдела травматологии и реконструктивной хирургии

ул. Садовая-Черногрязская, д. 14/19, Москва, 105062

Ekaterina V. Chentsova — Dr. of Med Sci., professor, leading researcher, department of traumatology and reconstructive surgery

14/19, Sadovaya-Chernogriazskaya St., Moscow, 105062

БоровковаН. В.BorovkovaN. V.

Наталья Валерьевна Боровкова — д-р мед. наук, заведующая отделением биотехнологий и трансфузиологии, ГБУЗ «НИИ скорой помощи им. Н.В. Склифосовского» Департамента здравоохранения города Москвы»; доцент кафедры трансплантологии и искусственных органов, ФГАОУ ВО «РНИМУ им. Н.И. Пирогова» Минздрава России

площадь Большая Сухаревская, д. 3, Москва, 129090,

ул. Островитянова, д. 1, Москва, 117997,

 

Natalya V. Borovkova —  Dr.  of  Med.  Sci.,  head  of  the  department of biotechnologies  and  transfusiology,  N.V. Sklifosovsky Research Institute for Emergency Medicine; associate  professor  of  chair of transplantology and artificial organs, Pirogov Russian National Research Medical University

3, Bolshaya Sukharevskaya Square, Moscow, 129090,

1, Ostrovityanova St., Moscow, 117997

https://orcid.org/0009-0007-5148-1712СироткинаК. В.SirotkinaK. V.

Ксения Валерьевна Сироткина — врач-офтальмолог, аспирант отдела травматологии и реконструктивной хирургии

ул. Садовая-Черногрязская, д. 14/19, Москва, 105062

Kseniya V. Sirotkina — PhD student, ophthalmologist, department of traumatology and reconstructive surgery

14/19, Sadovaya-Chernogriazskaya St., Moscow, 105062

sirotkina.ksen8@yandex.ruБезносО. В.BeznosO. V.

Ольга Валерьевна Безнос — врач отдела патофизиологии и биохимии 

ул. Садовая-Черногрязская, д. 14/19, Москва, 105062

Olga V. Beznos — researcher, department of pathophysiology and biochemistry

14/19, Sadovaya-Chernogriazskaya St., Moscow, 105062

МакаровМ. С.MakarovM. S.

Максим Сергеевич Макаров — канд. биол. наук, старший научный сотрудник

ул. Островитянова, д. 1, Москва, 117997

Maksim S. Makarov — Cand. of Biol. Sci., senior researcher, department of biotechnologies and transfusiology

3, Bolshaya Sukharevskaya Square, Moscow, 129090

ПономаревИ. Н.PonomarevI. N.

Иван Николаевич Пономарев — канд. мед. наук, старший научный сотрудник отделения биотехнологий и трансфузиологии

ул. Островитянова, д. 1, Москва, 117997

Ivan N. Ponomarev — Cand. of Med. Sci., senior researcher, department of biotechnologies and transfusiology

3, Bolshaya Sukharevskaya Square, Moscow, 129090

СторожеваМ. В.StorozhevaM. V.

Майя Викторовна Сторожева — научный сотрудник отделения биотехнологий и трансфузиологии

ул. Островитянова, д. 1, Москва, 117997

Maya V. Storozheva — senior researcher, department of biotechnologies and transfusiology

3, Bolshaya Sukharevskaya Square, Moscow, 129090

ФГБУ «НМИЦ глазных болезней им. Гельмгольца» Минздрава РоссииРоссияHelmholtz National Medical Research Center of Eye DiseasesRussian FederationГБУЗ «НИИ скорой помощи им. Н.В. Склифосовского» Департамента здравоохранения города Москвы»; ФГАОУ ВО «РНИМУ им. Н.И. Пирогова» Минздрава РоссииРоссияN.V. Sklifosovsky Research Institute for Emergency Medicine; Pirogov Russian National Research Medical UniversityRussian FederationГБУЗ «НИИ скорой помощи им. Н.В. Склифосовского» Департамента здравоохранения города Москвы»РоссияN.V. Sklifosovsky Research Institute for Emergency MedicineRussian Federation202605042026191155160Copyright © Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Сироткина К.В., Безнос О.В., Макаров М.С., Пономарев И.Н., Сторожева М.В., 20262026Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Сироткина К.В., Безнос О.В., Макаров М.С., Пономарев И.Н., Сторожева М.В.Chentsova E.V., Borovkova N.V., Sirotkina K.V., Beznos O.V., Makarov M.S., Ponomarev I.N., Storozheva M.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://roj.igb.ru/jour/article/view/2062

Цель работы — оценить эффективность применения лизата богатой тромбоцитами плазмы (БоТП) для снижения активности ферментов матриксных металлопротеиназ (ММП) в слезной жидкости (СЖ) и профилактики лизиса трансплантата у пациентов после кератопластики по неотложным показаниям.

Материал и методы

Материал и методы. В исследование включено 10 пациентов 18–76 лет после сквозной кератопластики по поводу перфорации роговицы и расплавления кератотрансплантата. Группу контроля составили 12 добровольцев 20–73 лет без офтальмопатологии (24 глаза). Все пациенты в посттрансплантационном периоде на фоне стандартной терапии получали лизат БоТП в инъекциях и инстилляциях. СЖ забирали с помощью фильтровальной бумаги до операции и на 7-е сутки после нее. Концентрацию ММП-9 и тканевого ингибитора ММП (ТИМП-1) определяли методом иммуноферментного анализа. Клиническим критерием оценки течения раннего послеоперационного периода служила площадь эпителизации кератотрансплантата на 7-е сутки.

Результаты

Результаты. Концентрации ММП-9 в СЖ всех пациентов до операции были достоверно выше, чем в группе контроля. При этом у пациентов, поступающих на рекератопластику, уровень ММП-9 был выше, чем у поступающих на первую кератопластику: 15,50 ± 1,54 и 17,28 ± 0,47 нг/мл соответственно против 3,03 ± 0,57 нг/мл в контрольной группе (p < 0,05). Применение лизата БоТП у первичных пациентов привело к статистически значимому снижению уровня ММП-9 после операции. У повторных пациентов на фоне применения лизата БоТП после операции отмечалась тенденция к снижению уровня ММП-9 в СЖ.

Заключение

Заключение. Своевременное снижение концентрации ММП-9 в СЖ после выполнения им основных функций в процессе репарации является необходимым условием для приживления кератотрансплантата. Лизат БоТП — источник ТИМП-1 в высоких концентрациях и может применяться для профилактики и лечения кератолизиса в условиях ургентной хирургии.

Purpose

Purpose: to estimate the effectiveness of platelet-rich plasma (PRP) lysate to reduce the activity of matrix metalloproteinases in tear fluid and prevent graft lysis in patients after urgent keratoplasty.

Material and methods

Material and methods. The study was carried out on 10 patients after urgent penetrating keratoplasty. Control group included 12 healthy adults (24 eyes). After surgery, patients received PRP lysate in subconjunctival injections and instillations. Tear fluid was collected using filter paper before the operation and on the 7th day after it. Concentrations of MMP-9 and TIMP-1 in tears were determined by ELISA. Clinical criterion for the corneal status in the early postoperative period was the area of transplant epithelization on the 7-th day after surgery.

Results

Results. Concentrations of MMP-9 in tears in all patients before surgery were significantly higher than in healthy controls. Patients with repeat keratoplasty had higher MMP-9 concentration than ones before the first keratoplasty — 15.50 ± 1.54 ng/ml and 17.28 ± 0.47 ng/ml. Treatment with PRP lysate caused a statistically significant decrease of MMP-9 concentration in tears of patients after first keratoplasty. Patients with repeat keratoplasty demonstrated a tendency for decrease of MMP-9 concentration after treatment.

Conclusion

Conclusion. Timely decrease of MMP-9 activity in cornea after its function in the tissue remodeling is completed is a necessary condition for the successful corneal engraftment. PRP lysate contains a large amount of TIMP-1 and can be used for the prevention of keratolysis in urgent corneal surgery.

кератопластикализат богатой тромбоцитами плазмыматриксная металлопротеиназа-9тканевой ингибитор матриксных металлопротеиназ-1кератолизисслезаkeratoplastyplatelet-rich plasma lysatematrix metalloproteinase-9tissue inhibitor of matrix metalloproteinases-1keratolysistearsReferencesМороз З.И., Малюгин Б.Э., Горохова М.В., Ковшун Е.В. Результаты кератопластики при фистулах роговицы с использованием УФ-кросслинкинга модифицированного донорского материала. Офтальмохирургия. 2014; 2: 29–32.Moroz Z.I., Maljugin B.E., Gorokhova M.V., Kovshun E.V. UV cross-linked donor corneas for penetrating keratoplasties in corneal perforations. Fyodorov journal of ophthalmic surgery. 2014; 2: 29–32 (In Russ.).Бржеская И.В., Сомов Е.Е. Коллагенолитическая активность конъюнктивальной жидкости у здоровых людей и больных с асептической язвой роговицы различной этиологии. Клиническая офтальмология. 2018; 2: 77–80. doi:10.21689/2311-7729-2018-18-2-77-80Brzheskaya I.V., Somov E.E. Collagenolytic activity of conjunctival fluid in healthy people and patients with aseptic corneal ulcer of various etiologies. Klinicheskaya oftal’mologiya. 2018; 2: 77–80 (In Russ.). doi:10.21689/2311-7729-2018-18-2-77-80Григоркевич О.С., Мокров Г.В., Косова Л.Ю. Матриксные металлопротеиназы и их ингибиторы. Фармакокинетика и фармакодинамика. 2019; 2: 3–16. https://doi.org/10.24411/2587-7836-2019-10040Grigorkevich O.S., Mokrov G.V., Kosova L.Yu. Matrix metalloproteinases and their inhibitors. Pharmacokinetics and Pharmacodynamics. 2019; 2: 3–16 (In Russ.). https://doi.org/10.24411/2587-7836-2019-10040Visse R, Nagase H. Matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases: structure, function, and biochemistry. Circ Res. 2003; 92 (8): 827–39. doi: 10.1161/01.RES.0000070112.80711.3DVisse R, Nagase H. Matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases: structure, function, and biochemistry. Circ Res. 2003; 92 (8): 827–39. doi: 10.1161/01.RES.0000070112.80711.3DSklenářová R, Akla N, Latorre MJ, Ulrichová J, Franková J. Collagen as a biomaterial for skin and corneal wound healing. J Funct Biomater. 2022; 13 (4): 249. doi:10.3390/jfb13040249Sklenářová R, Akla N, Latorre MJ, Ulrichová J, Franková J. Collagen as a biomaterial for skin and corneal wound healing. J Funct Biomater. 2022; 13 (4): 249. doi:10.3390/jfb13040249Целая Т.В., Ченцова Е.В., Боровкова Н.В. Трансплантация клеток слизистой оболочки полости рта при лечении лимбально-клеточной недостаточности. Трансплантология. 2022; 14 (1): 68–78. https://doi.org/10.23873/2074-0506-2022-14-1-68-78Tselaya T.V., Chentsova E.V., Borovkova N.V. Transplantation of cells of the oral mucosa in the treatment of limbal stem cell deficiency. Transplantologiya. The Russian journal of transplantation. 2022; 14 (1): 68–78 (In Russ.). https://doi.org/10.23873/2074-0506-2022-14-1-68-78Флора С.В., Ченцова Е.В., Целая Т.В. Кросслинкинг силиковысушенного трансплантата роговицы как средство повышения эффективности ургентной кератопластики. Российский офтальмологический журнал. 2023; 16 (4): 92–6. https://doi.org/10.21516/2072-0076-2023-16-4-92-96Flora S.V., Chentsova E.V., Tselaya T.V. Silicon-dried corneal graft crosslinking as a means to increase the effectiveness of urgent keratoplasty. Russian ophthalmological journal. 2023; 16 (4): 92–6 (In Russ.). https://doi.org/10.21516/2072-0076-2023-16-4-92-96Ченцова Е.В., Вериго Е.Н., Макаров П.В., Хазамова А.И. Кросслинкинг в комплексном лечении язв роговицы и трансплантата. Российский офтальмологический журнал. 2017; 10 (3): 93–100. https://doi.org/10.21516/2072-0076-2017-10-3-93-100Chentsova E.V., Verigo E.N., Makarov P.V., Khazamova A.I. Crosslinking in the complex treatment of corneal ulceration and corneal grafting. Russian ophthalmological journal. 2017; 10 (3): 93–100 (In Russ.). https://doi.org/10.21516/2072-0076-2017-10-3-93-100Плескова А.В., Катаргина Л.А., Иомдина Е.Н., Мамакаева И.Р., Панова А.Ю. Первый опыт комбинированного лечения язвы роговицы и трансплантата у детей дошкольного возраста с применением локального ультрафиолетового кросслинкинга (клинические случаи). Офтальмология. 2023; 20 (2): 358–62. https://doi.org/10.18008/1816-5095-2023-2-358-362Pleskova A.V., Katargina L.A., Iomdina E.N., Mamakaeva I.R., Panova A.Yu. First experience of combined treatment of corneal and graft ulcers in preschool children using local ultraviolet crosslinking (clinical cases). Ophthalmology in Russia. 2023; 20 (2): 358–62 (In Russ.). https://doi.org/10.18008/1816-5095-2023-2-358-362Cooper T, Eisen A, Stricklin G, Welgus H. Platelet-derived collagenase inhibitor: characterization and subcellular localization. Proc Natl Acad Sci USA. 1985; 82 (9): 2779–83. https://doi.org/10.1073/pnas.82.9.2779Cooper T, Eisen A, Stricklin G, Welgus H. Platelet-derived collagenase inhibitor: characterization and subcellular localization. Proc Natl Acad Sci USA. 1985; 82 (9): 2779–83. https://doi.org/10.1073/pnas.82.9.2779Villeneuve J, Block A, Le Bousse-Kerdilès MC, et al. Tissue inhibitors of matrix metalloproteinases in platelets and megakaryocytes: a novel organization for these secreted proteins. Exp Hematol. 2009 Jul; 37 (7): 849–56. doi: 10.1016/j.exphem.2009.03.009Villeneuve J, Block A, Le Bousse-Kerdilès MC, et al. Tissue inhibitors of matrix metalloproteinases in platelets and megakaryocytes: a novel organization for these secreted proteins. Exp Hematol. 2009 Jul; 37 (7): 849–56. doi: 10.1016/j.exphem.2009.03.009Holten-Anderson M, Brunner N, Christensen I, Jensen V, Nielsen H. Levels of tissue inhibitor of metalloproteinases-1 in blood transfusion components. Scand J Clin Lab Invest. 2002; 62 (3): 223–30. https://doi.org/10.1080/003655102317475489Holten-Anderson M, Brunner N, Christensen I, Jensen V, Nielsen H. Levels of tissue inhibitor of metalloproteinases-1 in blood transfusion components. Scand J Clin Lab Invest. 2002; 62 (3): 223–30. https://doi.org/10.1080/003655102317475489Xiao C, Ma Y, Wang H, et al. The anti-photoaging effects of pre- and posttreatment of platelet-rich plasma on UVB-damaged HaCaT keratinocytes. Photochem Photobiol. 2021; 97 (3): 589–99. https://doi.org/10.1111/php.13354Xiao C, Ma Y, Wang H, et al. The anti-photoaging effects of pre- and posttreatment of platelet-rich plasma on UVB-damaged HaCaT keratinocytes. Photochem Photobiol. 2021; 97 (3): 589–99. https://doi.org/10.1111/php.13354Федосеева Е.В., Ченцова Е.В., Боровкова Н.В. и др. Опыт применения тромбофибринового сгустка богатой тромбоцитами плазмы при язвенном поражении роговицы. Российский офтальмологический журнал. 2021; 14 (Приложение 4): 15–21. https://doi.org/10.21516/2072-0076-2021-14-4-supplement-15-21Fedoseeva E.V., Chentsova E.V., Borovkova N.V., et al. Experience of using a thrombofibrin clot of plateletrich plasma in ulcerative lesions of the cornea. Russian ophthalmological journal. 2021; 14 (Supplement 4): 15–21 (In Russ.). https://doi.org/10.21516/2072-0076-2021-14-4-supplement-15-21Федосеева Е.В., Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Алексеева И.Б., Романова И.Ю. Морфофункциональные особенности плазмы, богатой тромбоцитами, и ее применение в офтальмологии. Офтальмология. 2018; 15 (4): 388–93. https://doi.org/10.18008/1816-5095-2018-4-388-393Fedoseeva E.V., Chentsova E.V., Borovkova N.V., Alekseeva I.B., Romanova I.Yu. Morphofunctional peculiarities of platelet rich plasma and its application in ophthalmology. Ophthalmology in Russia. 2018; 15 (4): 388–93 (In Russ.). https://doi.org/10.18008/1816-5095-2018-4-388-393Шахбазян Н.П., Труфанов С.В., Суббот А.М., Применение лизата обогащенной тромбоцитами плазмы в лечении персистирующих эпителиальных дефектов после кератопластики. Офтальмологические ведомости. 2021; 14 (2): 27–35. doi: 10.17816/OV62857Shakhbazyan N.P., Trufanov S.V., Subbot A.M. The platelet-rich plasma lysate use in the treatment of persistent epithelial defects after keratoplasty. Ophthalmology reports. 2021; 14 (2): 27–35 (In Russ.). doi: 10.17816/OV62857Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Сироткина К.В. и др. Оценка концентрации тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ первого типа в различных тромбоцитарных препаратах. Российский офтальмологический журнал. 2024; 17 (4): 84–8. https://doi.org/10.21516/2072-0076-2024-17-4-84-88Chentsova E.V., Borovkova N.V., Sirotkina K.V., et al. Evaluation the tissue inhibitor of matrix metalloproteinases first type concentration in various platelet-related products. Russian ophthalmological journal. 2024; 17 (4): 84–8 (In Russ.). https://doi.org/10.21516/2072-0076-2024-17-4-84-88Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Сироткина К.В. и др. Регуляция активности коллагенолитических ферментов с помощью тромбоцитных препаратов in vitro. Российский офтальмологический журнал. 2025; 18 (1): 92–9. https://doi.org/10.21516/2072-0076-2025-18-1-92-99Chentsova E.V., Borovkova N.V., Sirotkina K.V., et al. Regulation of collagenolytic activity using platelet preparations in vitro. Russian ophthalmological journal. 2025; 18 (1): 92–9 (In Russ.). https://doi.org/10.21516/2072-0076-2025-18-1-92-99Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Сироткина К.В. и др. Способ предупреждения лизиса кератотрансплантата при ургентной хирургии. Патент РФ № 2822412; 2024.E.V., Borovkova N.V., Sirotkina K.V., et al. The way to preventing keratograft lysis in emergency surgery. Patent RF N 2822412; 2024 (In Russ.).Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Сироткина К.В., Безнос О.В., Павленко Т.А. Изучение показателей локальной протеолитической системы как предрасполагающих факторов развития кератолизиса у пациентов после экстренной кератопластики. Российский офтальмологический журнал. 2024; 17 (2): 82–8. https://doi.org/10.21516/2072-0076-2024-17-2-82-88Chentsova E.V., Borovkova N.V., Sirotkina K.V., Beznos O.V., Pavlenko T.A. Local proteolytic system indicators as suspective factors of keratolysis development after urgent keratoplasty. Russian ophthalmological journal. 2024; 17 (2): 82–8 (In Russ.). https://doi.org/10.21516/2072-0076-2024-17-2-82-88

The authors declare that there are no conflicts of interest present.