Регенераторные эффекты иммобилизированных ферментов гиалуронидазы и субтилизина на экспериментальных моделях химической и механической травмы роговицы

Цель работы — в условиях эксперимента изучить регенераторный потенциал препаратов иммобилизированных ферментов гиалуронидазы и субтилизина на моделях химической и механической травмы роговицы.

Материал и методы. Исследование выполнено на 28 беспородных кроликах массой 3,5–4,0 кг, разделенных на 4 группы для изучения моделей репарации при каждом виде травмы (химическая и механическая) в зависимости от препарата и метода его введения. Для исследований использованы пегилированные по технологии электронно-лучевого синтеза гиалуронидаза (ПЭГ-гиалуронидаза) и субтилизин (ПЭГ-субтилизин). Состояние роговицы оценивали через 24 ч после нанесения травмы, затем производилась энуклеация глаз с последующим гистологическим исследованием.

Результаты. В группах химической травмы при аппликации ПЭГ-гиалуронидазы выявлено уменьшение площади раны в среднем на 36,6 мм², а при субконъюнктивальном введении — на 36,08 мм²; при аппликации ПЭГ-субтилизина зарегистрировано увеличение площади дефекта роговицы в среднем на 11,63 мм² (зарегистрирован один случай перфорации), а при субконъюнктивальном введении ПЭГ-субтилизина площадь уменьшилась на 27,42 мм². В группах механической травмы наблюдалась аналогичная картина: при инстилляции ПЭГ-субтилизина площадь раны составила в среднем 53,63 мм² и зарегистрирован один случай перфорации, а при субконъюнктивальном введении площадь раны сократилась до 28,76 мм²; при применении ПЭГ-гиалуронидазы в виде инстилляций зарегистрировано достоверное уменьшение площади раны на 36 мм², при субконъюнктивальном введении площадь раневой поверхности сократилась на 70,3 %. Более высокие показатели прозрачности роговицы в оптической зоне и более слабая воспалительная реакция (по результатам гистологической оценки) наблюдались при применении ПЭГ-гиалуронидазы.

Заключение. Показано благоприятное влияние ПЭГ-гиалуронидазы, а именно усиление регенеративных процессов в ране при химическом и механическом воздействии. ПЭГ-субтилизин не продемонстрировал положительных эффектов, что может быть связано с его высокой фибринолитической активностью.

1. Всемирный доклад о проблемах зрения. Женева: Всемирная организация здравоохранения; 2020. Лицензия: CC BY-NC-SA 3.0 IGO.

2. Рыбакова Е.Г., Егорова Г.Б., Калинич Н.И. Корнерегель — новый стимулятор репаративной регенерации. РМЖ. Клиническая офтальмология. 2001; 4: 162–4.

3. Кадышев В.В., Кадышева Л.В. Применение стимуляторов регенерации роговицы при травматических повреждениях. РМЖ. Клиническая офтальмология. 2011. 4: 153–5.

4. Castillo TN, Pouliot MA, Kim HJ, Dragoo JL. Comparison of growth factor and platelet concentration from commercial platelet-rich plasma separation systems. Am J Sports Med. 2011 Feb; 39 (2): 266–71. doi: 10.1177/0363546510387517

5. Walkden A. Amniotic membrane transplantation in ophthalmology: An updated perspective. Clin Ophthalmol. 2020 Jul 22; 14: 2057–72. doi: 10.2147/OPTH.S208008

6. Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Макаров П.В. и др. Биологический эффект комбинации лизата тромбоцитов и амниотической мембраны в культуре буккального эпителия. Российский офтальмологический журнал. 2022; 15 (4): 115–20.

7. Duncan R, Spreafico F. Polymer conjugates. Pharmacokinetic considerations for design and development. Clin Pharmacokinet. 1994 Oct; 2 7(4): 290–306. doi: 10.2165/00003088-199427040-00004

8. Khandare J, Minko T. Polymer-drug conjugates: Progress in polymeric prodrugs. Progress in Polymer Science. 2006; 31 (4), 359–97. doi:10.1016/j.progpolymsci.2005.09.004

9. Lv S-H, Rong S-F, Cai B-G, Guan S-M, Li Q-Q. Property and current clinical applications of mammal hyaluronidase. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2015 Oct; 19 (20): 3968–76. PMID: 26531287.

10. Atkinson WS. Use of hyaluronidase with local anesthesia in ophthalmology; Preliminary report. Arch Ophthal. 1949 Nov; 42 (5): 628–33. doi: 10.1001/archopht.1949.00900050638012

11. Шмырева В.Ф., Иванова А.С., Федоров А.А., Петров С.Ю., Макарова А.С. Медико-биологическое исследование лонгидазы. Часть 1. Глаукома. 2011; 4: 5–10.

12. Zhi-Liang W, Wo-Dong S, Min L, Xiao-Ping B, Jin J. Pharmacologic vitreolysis with plasmin and hyaluronidase in diabetic rats. Retina. 2009 Feb; 29 (2): 269–74. doi: 10.1097/IAE.0b013e3181923ff0

13. Гндоян И.А. Комбинированное лечение (лазерное и ферментативное) послеоперационного гемофтальма. Вестник ВолГМУ. 2012; 1 (41): 48–51.

14. Гндоян И.А. Применение фибринолитического препарата Тромбовазим в лечении фибриноидного синдрома после экстракции катаракты. Вестник ВолгГМУ. 2012; 2 (42): 28–32.

15. Obenberger J. Paper strips and rings as simple tools for standardization of experimental eye injuries. Ophthalmic Res. 1975 May; 7 (5): 363–7. doi: 10.1159/000264772

16. Hanna C. Bicknell D.S., O'Brien J.E. Cell turnover in the adult human eye. Arch Ophthalmol. 1961 May; 65: 695–8. doi: 10.1001/archopht.1961.01840020697016

17. Войно-Ясенецкий В.В. Разрастание и изменчивость тканей глаза при его заболеваниях и травмах. Киев: Вища школа; 1979.