Оценка концентрации тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ первого типа в различных тромбоцитарных препаратах

Цель работы — оценить содержание тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ первого типа (ТИМП-1) в тромбоцитарных препаратах, полученных разными способами.

Материал и методы. Из крови 10 доноров-добровольцев выделяли богатую тромбоцитами плазму (БоТП), бедную тромбоцитами плазму, суспензию тромбоцитов, отмытых от плазмы (ОтмТр), проводили морфофункциональный анализ тромбоцитов. После этого из БоТП, ОтмТр и бедной тромбоцитами плазмы готовили лизат тромбоцитов. Концентрацию ТИМП-1 в лизатах определяли с помощью иммуноферментного анализа.

Результаты. Уровень ТИМП-1 в лизатах БоТП и ОтмТр достоверно не различался, в бедной тромбоцитами плазме уровень ТИМП-1 был достоверно ниже, чем в лизатах БоТП и ОтмТр (р = 0,003). Во всех типах препаратов концентрация ТИМП-1 в 2–4 раза превышала аналогичные значения в сыворотке крови здоровых людей, приводимые в других исследованиях. Выявлена слабая корреляция между концентрацией ТИМП-1 и количеством тромбоцитов в БоТП, корреляционная связь между содержанием тромбоцитов с гранулами и уровнем ТИМП-1 в лизатах отсутствовала. Присутствие лейкоцитов в исходной БоТП также не влияло на уровень ТИМП в конечных лизатах. Выявлена сильная корреляционная связь между концентрацией ТИМП-1 в лизате ОтмТр и в бедной тромбоцитами плазме, а также прямая корреляция между общим содержанием тромбоцитов и уровнем ТИМП-1 в лизате БоТП.

Заключение. Препараты с высокими концентрациями ТИМП-1 могут быть получены как из концентрированных суспензий тромбоцитов, так и из бедной тромбоцитами плазмы. Для оптимизации методики необходимо исследование эффекта тромбоцитарных препаратов с ТИМП на различных биологических моделях.

1. Федосеева Е.В., Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Алексеева И.Б., Романова И.Ю. Морфофункциональные особенности плазмы, богатой тромбоцитами, и ее применение в офтальмологии. Офтальмология. 2018; 15 (4): 388–93. https://doi.org/10.18008/1816-5095-2018-4-388-393

2. Amable PR, Carias RB, Teixeira MV, et al. Platelet-rich plasma preparation for regenerative medicine: optimization and quantification of cytokines and growth factors. Stem Cell Res Ther. 2013 Jun 7; 4 (3): 67. doi: 10.1186/scrt218

3. Боровкова Н.В., Макаров М.С., Андреев Ю.В. и др. Оценка цитокинового состава сыворотки крови и препаратов на основе тромбоцитов человека. Молекулярная медицина. 2021; 19 (3): 51–7. doi: 10.29296/24999490-2021-03-08

4. Макаров М.С., Кобзева Е.Н., Высочин И.В. и др. Морфофункциональный анализ тромбоцитов человека с помощью витального окрашивания. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2013; 156 (9): 388–91.

5. Delgado JJ, Sánchez E, Baro M, et al. A platelet derived growth factor delivery system for bone regeneration. J Mater Sci Mater Med. 2012 Aug; 23 (8): 1903–12. doi: 10.1007/s10856-012-4661-z

6. Филатова И.А., Павленко Ю.А., Шеметов С.А. и др. Эффективность применения лизата богатой тромбоцитами плазмы при лечении пациентов с посттравматическими рубцовыми изменениями век. Обзор клинических случаев. Российский офтальмологический журнал. 2021; 14 (4) (Приложение): 22–6. https://doi.org/10.21516/2072-0076-2021-14-4-supplement-22-26

7. Федосеева Е.В., Ченцова Е.В., Н.В. Боровкова. Случай применения аутологичного тромбофибринового сгустка у пациента с послеожоговой персистирующей эрозией роговицы. Трансплантология. 2019; 11 (2): 150–7. https://doi.org/10.23873/2074-0506-2019-11-2-150-157

8. Федосеева Е.В., Ченцова Е.В., Боровкова Н.В. и др. Возможности богатой тромбоцитами плазмы в лечении дефектов роговицы. Точка зрения. Восток — Запад. 2019; 1: 51–3. doi:10.25276/2410-1257-2019-1-51-53

9. Федосеева Е.В., Ченцова Е.В., Боровкова Н.В. и др. Опыт применения тромбофибринового сгустка богатой тромбоцитами плазмы при язвенном поражении роговицы. Российский офтальмологический журнал. 2021; 14 (4) (Приложение): 15–21. https://doi.org/10.21516/2072-0076-2021-14-4-supplement-15-21

10. Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Макаров П.В., и др. Биологический эффект комбинации лизата тромбоцитов и амниотической мембраны в культуре буккального эпителия. Российский офтальмологический журнал. 2022; 15 (4): 115–20. https://doi.org/10.21516/2072-0076-2022-15-4-115-120

11. Лошкарева А.О., Майчук Д.Ю. Применение богатой тромбоцитами плазмы у пациентов с хроническими эрозиями роговицы. Современные технологии в офтальмологии. 2016; 4: 131–2.

12. Cooper T, Eisen A, Stricklin G, et al. Platelet-derived collagenase inhibitor: characterization and subcellular localization. Proc. of the National Academy of Sciences of the United States of America. 1985; 82 (9): 2779–83. doi:10.1073/pnas.82.9.2779

13. Murate T, Yamashita K, Isogai C, et al. The production of tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMPs) in megakaryopoiesis: possible role of platelet- and megakaryocyte-derived TIMPs in bone marrow fibrosis. British Journal of Haematology. 1997; 99 (1): 181–9. doi:10.1046/j.1365-2141.1997.3293146.x

14. Holten-Anderson M, Brunner N, Christensen I, et al. Levels of tissue inhibitor of metalloproteinases-1 in blood transfusion components. Scandinavian Journal of Clinical and Laboratory Investigation. 2002; 62 (3): 223–30. doi:10.1080/003655102317475489

15. Zhao H, Zhao Z, Li D, et al. Efect study of exosomes derived from platelet-rich plasma in the treatment of knee cartilage defects in rats. Journal of Orthopaedic Surgery and Research. 2023; 18: 160. https://doi.org/10.1186/s13018-023-03576-0

16. Мороз З.И., Малюгин Б.Э., Горохова М.В., Ковшун Е.В. Результаты кератопластики при фистулах роговицы с использованием УФ-кросслинкинга модифицированного донорского материала. Офтальмохирургия. 2014; 2: 29–32.

17. Ченцова Е.В., Вериго Е.Н., Макаров П.В. и др. Кросслинкинг в комплексном лечении язв роговицы и трансплантата. Российский офтальмологический журнал. 2017; 10 (3): 93–100. https://doi.org/10.21516/2072-0076-2017-10-3-93-100

18. Orchard J, Massey A, Brown R, Cardon-Dunbar A, Hofmann J. Successful management of tendinopathy with injections of the MMP-inhibitor aprotinin. Clinical Orthopaedics and Related Research. 2008; 466 (7): 1625–32. https://doi.org/10.1007/s11999-008-0254-z

19. Sen Е, Balikoglu-Yilmaz M, Bozag-Pehlivan S, et al. Effect of doxycycline on postoperative scarring after trabeculectomy in an experimental rabbit model. Journal of ocular pharmacology and therapeutics: history and future directions. 2010; 26 (5): 399–406. https://doi.org/10.1089/jop.2010.0064

20. Li D, Zhou N, Zhang L, et al. Pflugfelder Suppressive Effects of Azithromycin on Zymosan-Induced Production of Proinflammatory Mediators by Human Corneal Epithelial Cells. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2010; 51 (11): 5623–9. https://doi.org/10.1167/iovs.09-4992

21. Lee E, Vaughan D, Parikh S, et al. Regulation of matrix metalloproteinases and plasminogen activator inhibitor-1 synthesis by plasminogen in cultured human vascular smooth muscle cells. Circulation Research. 1996; 78 (1): 44–9. https://doi.org/10.1161/01.res.78.1.44

22. Shu-Chen C, Shun-Fa Y, Ko-Huang L. Regulation of gelatinases expression by cytokines, endotoxin, and pharmacological agents in the human osteoarthritic knee. Connective Tissue Research. 2004; 45 (3): 142–50. https://doi.org/10.1080/03008200490506058

23. Villeneuve J, Block A, Le B, et al. Tissue inhibitors of matrix metalloproteinases in platelets andmegakaryocytes: a novel organization for these secreted proteins. Experimental Hematology. 2009; 37 (7): 849–56. https://doi.org/10.1016/j.exphem.2009.03.009