Клиническое значение оценки субпопуляционного состава лимфоцитов крови пациентов с инфекционным поражением роговицы при кератопластике высокого риска

Цель работы — исследование сдвигов в субпопуляционном составе лимфоцитов крови пациентов с инфекционным поражением роговицы в зависимости от количества перенесенных  кератопластик (КП).

Материал и методы. Обследовано 53 пациента в возрасте от 18 до 79 лет с инфекционным кератитом, разделенных в зависимости от количества проведенных КП на три группы: I (n = 27) — без КП; II (n = 12) — после одной КП; III группа (n = 14) — после двух и более КП. В контрольную  группу включили 33 практически здоровых донора с гендерными и возрастными показателями, аналогичными группам исследования. Методом проточной цитометрии в крови определяли относительное и абсолютное содержание субпопуляций Т-лимфоцитов (CD3+), Т-хелперов (CD3+CD4+CD8-), T-цитотоксических клеток (СD3+CD4-CD8+), дубль-позитивных Т-лимфоцитов (СD3+CD4+CD8+), NK-клеток (CD16+СD56+), В-лимфоцитов (CD19+), рассчитывали индекс СD4+/СD8+.

Результаты. Анализ общей популяции Т-лимфоцитов и субпопуляции CD3+CD4+ показал  достоверное повышение абсолютного количества Т-лимфоцитов у пациентов II группы (CD3+:  1,77  ± 0,10  × 10 ⁹ /л, Т-хелперы: 1,02  ± 0,09  × 10 ⁹ /л)  по сравнению  с I группой  (1,44  ± 0,06  × 10 ⁹ /л и 0,85 ± 0,03 × 10 ⁹ /л соответственно). В III группе отмечалось существенное и значимое увеличение относительного количества CD3+CD4+ (50,1  ± 1,9 %) по сравнению  с группами  без КП (I: 43,2 ± 1,5 %) и однократным  хирургическим вмешательством (II: 43,3 ± 1,8 %), что привело к достоверному  увеличению соотношения  CD4+/CD8+ в III группе (2,16  ± 0,19).  В крови всех больных (I группа: 0,020 ± 0,003 × 10 ⁹ /л, II: 0,030 ± 0,002 × 10 ⁹ /л, III: 0,030 ± 0,001 × 10 ⁹ /л)  выявлено достоверное повышение абсолютного количества дубль-позитивных Т-лимфоцитов (CD3+CD4+CD8+) по сравнению с контролем (0,009 ± 0,007 × 10 ⁹ /л).

Заключение. Выявленные изменения в клеточной составляющей иммунного статуса, общие для всех пациентов, характеризовались исключительно сдвигами Т-звена иммунитета. Индивидуальный анализ по характеру сдвигов Т-хелперов и CD4+/CD8+ в сторону повышения от нормы позволил качественно выделить III группу (с двумя и более КП). Полученные данные представляются важными для разработки критериев прогнозирования КП высокого риска и свидетельствуют о необходимости иммуносупрессии.

1. Слепова О.С., Быковская Г.Н., Макаров П.В. и др. Исследование эффективности применения циклоспорина А у больных с высоким риском отторжения кератотрансплантата. Вестник офтальмологии. 2007; 123 (4): 19–22.

2. Труфанов С.В., Суббот А.М., Маложен С.А., Крахмалева Д.А., Саловарова Е.П. Реакция тканевой несовместимости после трансплантации роговицы. Офтальмология. 2017; 14 (3): 180–7. https://doi.org/10.18008/1816-5095-2017-3

3. Гундорова Р.А., Ченцова Е.В., Макаров П.В., Кугушева А.Э., Ракова А.В. Опыт пересадки обезвоженной роговицы. Вестник офтальмологии. 2011; (4): 59–62.

4. Труфанов С.В., Суббот А.М., Саловарова Е.П. Факторы риска, клинические проявления, методы профилактики и лечения реакции отторжения трансплантата роговицы. Вестник офтальмологии. 2016; 132 (6): 108–16.

5. Миронкова Е.А., Демкин В.В., Слепова О.С. и др. Диагностика и роль ВГЧ-6 инфекции при кератопластике высокого риска. Российский офтальмологический журнал. 2012; 5 (3): 30–4.

6. Куликова И.Г., Балацкая Н.В., Ковалева Л.А., Макаров П.В. Частота сдвигов от нормы в субпопуляционном составе крови пациентов с центральной язвой роговицы. Медицинская иммунология. 2018; 20 (2): 263–70. https://doi.org/10.15789/1563-0625-2018-2-263-270

7. Носик А.В., Коротков С.В., Смольникова В.В. и др. Эффекторные CD4+ Т-лимфоциты и дендритные клетки — неинвазивные биомаркеры позднего клеточного отторжения при трансплантации почки. Трансплантология. 2018; 10 (3): 207–16. https://doi.org/10.23873/2074-0506-2018-10-3-207-216

8. Коротков С.В., Носик А.В., Смольникова В.В. и др. CD4+ Т-клетки и их популяции как прогностический маркер острого отторжения при трансплантации почки. Наука и инновации. 2016; (8): 33–7.

9. Kotton C.N. CMV: Prevention, diagnosis and therapy. Amer. J. Transplant. 2013; (13): 24–40. doi:10.1111/ajt.12006

10. Maguire O., Tario J.D., Shanahan T.C., Wallace P.K., Minderman H. Flow cytometry and solid organ transplantation: a perfect match. Immunol. Invest. 2014; 43 (8): 756–74. doi: 10.3109/08820139.2014.910022

11. Wood K.J., Bushell A., Hester J. Regulatory immune cells in transplantation. Nat. Rev. Immunol. 2012 May 25; 12 (6): 417–30. doi: 10.1038/nri3227

12. Шутко А.Н., Герасимова О.А., Екимова Л.П., Жеребцов Ф.К., Гранов А.М. Особенности субпопуляционного состава лимфоцитов крови у реципиентов в течение первого месяца после пересадки печени. Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2015; 17 (1): 68–73. doi: 10.15825/1995-1191-2015-1-68-73

13. Adenugba A. NK cells in transplantation. Transplantation. 2017; 101 (10): 2262–4. doi: 10.1097/TP.0000000000001914

14. Shaffer B.C., Hsu K.C. How important is NK alloreactivity and KIR in allogeneic transplantation? Best Pract. Res. Clin. Haematol. 2016; 29 (4): 351–8. doi: 10.1016/j.beha.2016.10.010

15. Cuff A.O., Robertson F.P, Stegmann K.A., et al. Eomeshi NK cells in human liver are long-lived and do not recirculate but can be replenished from the circulation. J. Immunol. 2016 Dec 1; 197 (11): 4283–91. doi: 10.4049/jimmunol.1601424

16. Nascimbeni M., Shin E.C., Chiriboga L., Kleiner D.E., Rehermann B. Peripheral CD4 (+) CD8(+) T cells are differentiated effector memory cells with antiviral functions. Blood. 2004 Jul 15; 104 (2): 478–86. doi: 10.1182/blood-2003-12-4395

17. Балацкая Н.В., Еремеева Е.А., Слепова О.С. и др. Субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови у пациентов с возрастной макулярной дегенерацией. Медицинская иммунология. 2015; 17 (5): 461–6. https://doi.org/10.15789/1563-0625-2015-5-461-466